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目的:根据尺寸分离DNA分子。这可以用于法医目的,以寻找特定基因或亲子鉴定的疾病。

简要概述:DNA是带负电,以便通过尺寸分离它,将其放入溶液中,该溶液通过其运行,将带负电荷的DNA拉到另一端。

较大的DNA遇到溶液中的耐受性更多,因此在相同的时间之后不移动到较小的段。

一旦电流已经运行,添加染料以便看到DNA的带(也称为泳道),并且基于它们的位置已知DNA的长度(测量基对)。

这个怎么运作

该过程包括限制酶,梳子,缓冲液,野生糖凝胶,DNA,尺寸标准和电泳箱

词汇

缓冲:允许电荷流过凝胶的极性溶液。

加载缓冲区:主要由溴苯酚蓝制成的跟踪染料在50%甘油溶液中(但可以是二甲苯氰基和蔗糖)。甘油增稠了DNA,意味着它将在凝胶中吸收,而不是在缓冲液中漂浮。

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限制酶:在特定序列上切割DNA的细菌。

车道:在凝胶中形成的DNA条带

基本步骤

  1. Aragonese和缓冲液混合在一起并微波炉以产生凝胶。将其倒入模具中并具有“梳子”,使其放置在其中以制造待插入DNA的孔。一旦它冷却,梳子被移除。凝胶电泳 - 步骤
  2. 然后将凝胶置于凝胶电泳盒中,并将缓冲溶液倒入其中。缓冲器传导电流。
  3. 为了准备必须使用DNA限制酶。
  4. 使用微量移液管插入孔(以及尺寸标准)中的DNA。大小标准已包含加载缓冲区,但DNA样本需要它。加载缓冲液染色DNA并使其更厚。
  5. 然后打开电流。放置DNA的侧面是带负电,相反的一侧是阳性的。DNA中的磷酸盐骨架是负的将其拉向正侧。DNA排斥负电荷启动运动。
引用本文为:威廉安德森(Schoolworkhelper编辑组),“凝胶电泳:基础和步骤”学校努力,2019年,//www.chadjarvis.com/gel-electophoresis-basics -steps/

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